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電生理實(shí)驗(yàn)技術(shù)

更新時間:2022-09-08 00:00:00       點(diǎn)擊次數(shù):7945

什么是LTP?

長時程增強(qiáng)(Long-term potentiation,LTP)是短時間快速重復(fù)高頻刺激傳入神經(jīng)元,突觸傳遞效率長時程增強(qiáng)。存在于海馬等區(qū)域,被廣泛認(rèn)為是學(xué)習(xí)和記憶的神經(jīng)基礎(chǔ)。

我們可以用LTP電生理研究什么?

1.LTP與行為學(xué)關(guān)系密切,是評價(jià)學(xué)習(xí)和記憶及其突觸可塑性的常用電生理指標(biāo)。2.LTP的改變可能會導(dǎo)致一些神經(jīng)系統(tǒng)疾病,包括抑郁癥、帕金森病、癲癇和神經(jīng)性疼痛。LTP受損可能會對阿爾茨海默病和成癮藥物也有一定作用。

體場電位電生理手段研究腦區(qū)的優(yōu)勢

如海馬CA1區(qū)的場電位,是經(jīng)典的神經(jīng)電生理研究方法。在體海馬場電位記錄與離體腦片相比,優(yōu)點(diǎn)是完整保留了海馬內(nèi)部結(jié)構(gòu)及與周圍組織的所有神經(jīng)纖維聯(lián)系,能全面的反應(yīng)海馬突觸的活動及藥物的真實(shí)效能。因此,在體LTP的記錄比離體腦片的記錄更受到重視。

在體LTP電生理記錄過程

1.手術(shù)和電極位置

用烏來糖腹腔給藥麻醉大鼠,將大鼠頭部固定在立體定位儀上,體溫維持在37℃。暴露顱骨。根據(jù)大鼠腦立體定位圖譜,以Bregma作為參考點(diǎn),確定刺激和記錄位點(diǎn)。

2.電極深度的確定

緩慢、精細(xì)地調(diào)節(jié)刺激電極和記錄電極的深度,直至出現(xiàn)興奮性突觸后場電位,然后固定兩電極的位置。

3.刺激強(qiáng)度的確定

出現(xiàn)興奮性突觸后場電位后,不斷改變刺激強(qiáng)度,以得出刺激一反應(yīng)強(qiáng)度曲線,把引起最大反應(yīng)的電流強(qiáng)度確定為最適刺激強(qiáng)度。

4.場電位記錄

在刺激位點(diǎn),每分鐘給予一個單脈沖刺,記錄30min基線水平的fEPSP。

5.LTP的誘導(dǎo)

在刺激位點(diǎn),每分鐘給予一個單脈沖刺激 ,記錄30min基線水平的fEPSP后,用高頻脈沖串進(jìn)行強(qiáng)直刺激。然后,再以單個電脈沖刺激,每分鐘刺激一次,連續(xù)記錄3-6小時的fEPSP。把強(qiáng)直刺激后記錄的斜率與強(qiáng)直刺激前記錄的斜率進(jìn)行比較,以判斷LTP是否被誘導(dǎo)及維持。

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