一、HSV-1動(dòng)物模構(gòu)建常用動(dòng)物模型選擇

1. 小鼠模型（常用）

• 品系：BALB/c、C57BL/6、SKH-1無(wú)毛小鼠（便于觀察皮膚病變）。

• 優(yōu)點(diǎn)：成本低、操作方便；可模擬急性感染和潛伏感染。

• 局限性：小鼠對(duì)HSV-1的天然抵抗力較強(qiáng)，需調(diào)整病毒劑量或免疫抑制。

2. 兔模型（如新西蘭白兔）

• 應(yīng)用：眼部HSV-1感染（角膜炎模型）、潛伏感染研究。

• 特點(diǎn)：眼部和三叉神經(jīng)節(jié)潛伏感染與人類更相似。

3. 豚鼠模型

• 優(yōu)勢(shì)：可建立生殖器HSV-1感染模型，模擬皮膚-黏膜病變。

二、HSV-1動(dòng)物模構(gòu)建病毒接種方式與疾病模型

1. 急性感染模型

• 接種途徑：

• 角膜劃痕接種：模擬皰疹性角膜炎（病毒滴度通常為1×10?~10? PFU/眼）。

• 鼻內(nèi)/顱內(nèi)接種：研究中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染（如腦炎）。

• 足墊或皮膚接種：觀察局部病變和神經(jīng)侵襲。

• 表型：

• 接種后3-7天出現(xiàn)紅腫、潰瘍（皮膚/角膜）、神經(jīng)癥狀（豎毛、癱瘓）。

2. 潛伏-再激活模型

• 步驟：

• 物理刺激（紫外線照射、角膜劃痕）。

• 免疫抑制（環(huán)l酰胺、地s米松）。

• 應(yīng)激（熱休克、束縛應(yīng)激）。

1. 通過(guò)角膜或皮膚接種HSV-1（如KOS或McKrae株）。

2. 急性期后（約7-14天），病毒在三叉神經(jīng)節(jié)（TG）或背根神經(jīng)節(jié)（DRG）進(jìn)入潛伏狀態(tài)。

3. 再激活誘導(dǎo)：

• 檢測(cè)潛伏病毒：

• PCR檢測(cè)神經(jīng)節(jié)中HSV-1基因組（如LAT基因）。

• 體外神經(jīng)節(jié)培養(yǎng)后檢測(cè)病毒復(fù)活。

3. 免疫缺陷模型

• 應(yīng)用：研究宿主免疫應(yīng)答（如T細(xì)胞缺陷小鼠）。

• 例如：SCID小鼠或IFN-γ敲除小鼠，感染后癥狀更嚴(yán)重。

三、關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)參數(shù)

1. 病毒株選擇：

• 實(shí)驗(yàn)室常用株：KOS（低毒）、McKrae（高毒，易再激活）、17syn+（潛伏研究）。

2. 病毒滴度：

• 小鼠角膜/皮膚：10?~10? PFU；顱內(nèi)接種：103~10? PFU（避免快速致死）。

3. 感染監(jiān)測(cè)：

• 臨床癥狀評(píng)分（如眼部病變分級(jí)、皮膚損傷面積）。

• 病毒載量檢測(cè)：qPCR（如gB基因）或噬斑試驗(yàn)（Plaque Assay）。

• 免疫組化：檢測(cè)病毒抗原（如HSV-1 gD）。

• 組織病理：神經(jīng)節(jié)炎癥、神經(jīng)元壞死。

四、注意事項(xiàng)

1. 生物安全：HSV-1為BSL-2病原體，需在二級(jí)生物安全柜中操作。

2. 對(duì)照設(shè)置：

• 空白對(duì)照（PBS接種）、滅活病毒對(duì)照。

3. 動(dòng)物福利：

• 顱內(nèi)或高劑量感染可能導(dǎo)致癱瘓/死亡，需設(shè)定人道終點(diǎn)。

4. 潛伏感染驗(yàn)證：

• 需通過(guò)抗病d藥物（如阿x洛韋）清除急性期病毒后再檢測(cè)潛伏。

五、局限性及改進(jìn)方向

• 局限性：

• 小鼠模型難以w全模擬人類HSV-1的長(zhǎng)期潛伏周期。

• 兔/豚鼠成本高且操作復(fù)雜。

• 改進(jìn)方向：

• 人源化小鼠模型（移植人類神經(jīng)節(jié)組織）。

• 基因編輯動(dòng)物（如HSV-1受體轉(zhuǎn)基因小鼠）。