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簡要描述：肺炎克雷伯菌感染模型構(gòu)建是導(dǎo)致肺炎、血流感染和尿路感染的重要病原體，其動物模型廣泛用于研究致病機(jī)制、宿主免疫應(yīng)答及抗菌藥物評價(jià)
更新時(shí)間：2025-07-11 09:33:29
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| 感染類型 | 推薦動物 | 接種途徑 | 研究重點(diǎn) |
|---|---|---|---|
| 肺炎模型 | C57BL/6小鼠 | 鼻內(nèi)/氣管內(nèi)接種 | 肺部炎癥、細(xì)菌清除率 |
| 敗血癥模型 | BALB/c小鼠 | 尾靜脈注射 | 全身炎癥反應(yīng)、器官損傷 |
| 尿路感染模型 | C3H/HeN小鼠 | 膀胱內(nèi)灌注 | 膀胱定植、腎侵襲性 |
| 肝膿腫模型 | 糖尿病小鼠 | 門靜脈注射 | 高毒力株（hvKP）的致病機(jī)制 |
菌株選擇：
標(biāo)準(zhǔn)株：ATCC 43816（K2血清型）
高毒力株（hvKP）：NTUH-K2044（K1血清型，含magA基因）
培養(yǎng)條件：
LB培養(yǎng)基，37℃振蕩培養(yǎng)至對數(shù)期（OD600≈0.6，~10? CFU/mL）。
PBS洗滌2次，調(diào)整濃度至目標(biāo)CFU（如10?–10? CFU/50 μL）。
鼻內(nèi)接種（無需麻醉）：
小鼠仰臥固定，垂直滴鼻（50 μL菌液，含10?–10? CFU）。
氣管內(nèi)接種（精準(zhǔn)下呼吸道感染）：
麻醉后暴露氣管，注射30 μL菌液（需手術(shù)經(jīng)驗(yàn)）。
尾靜脈注射：
100 μL菌液（10?–10? CFU），監(jiān)測72小時(shí)生存率。
經(jīng)尿道灌注：
麻醉小鼠，導(dǎo)尿管插入膀胱。
注入50 μL菌液（10? CFU）并夾閉尿道1小時(shí)。
鏈脲佐菌素（STZ）預(yù)處理：
腹腔注射STZ（50 mg/kg×5天），血糖>300 mg/dL后接種。
門靜脈注射：
手術(shù)暴露門靜脈，注射100 μL菌液（10? CFU）。
組織勻漿法：
肺/肝/脾組織稱重，勻漿后梯度稀釋涂板（LB瓊脂），24小時(shí)后計(jì)數(shù)CFU。
血液培養(yǎng)（敗血癥模型）：
尾靜脈采血100 μL，鋪板檢測菌血癥。
組織病理：
4%多聚甲醛固定，H&E染色評估炎癥（中性粒細(xì)胞浸潤、膿腫形成）。
細(xì)胞因子檢測：
ELISA測定血清或肺灌洗液中IL-6、TNF-α水平。
記錄感染后7天內(nèi)生存率，繪制Kaplan-Meier曲線（Log-rank檢驗(yàn)）。
免疫抑制預(yù)處理：
環(huán)磷x胺（100 mg/kg）或抗中性粒細(xì)胞抗體（如抗-Ly6G）提高細(xì)菌定植。
黏液溶解劑：
接種前30分鐘滴注N-乙酰半胱a酸（NAC，10%），破壞呼吸道黏液屏障。
耐藥株構(gòu)建：
選擇臨床分離的碳青霉烯耐藥株（如KPC-KP），調(diào)整接種劑量（10?–10? CFU）。
生物安全：
高毒力株（hvKP）需在BSL-2+條件下操作。
倫理終點(diǎn)：
體重下降>20%或嚴(yán)重呼吸困難時(shí)需安樂s。
對照設(shè)置：
空白對照（PBS接種）、減毒株對照（如ΔwcaG突變體）。
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