一、動(dòng)物模型帕金森背景簡(jiǎn)介
自發(fā)現(xiàn)以來(lái)，6-OHDA一直在帕金森病的臨床前研究中扮演著重要角色。由Ungerstedt和Arbuthnott在1970年共同創(chuàng)立的單側(cè)注射旋轉(zhuǎn)模型成為了在模式動(dòng)物上被最為廣泛使用的帕金森模型之一。
6-羥多巴胺（6-hydroxydopamine，6-OHDA）是多巴胺的羥基化衍生物，因其化學(xué)結(jié)構(gòu)與DA類似，因此能夠同DA競(jìng)爭(zhēng)攝取位點(diǎn)，進(jìn)而被攝入胞內(nèi)。進(jìn)入胞內(nèi)后，6-OHDA能夠被氧化分解，產(chǎn)生活性氧，通過(guò)MAO（單胺氧化酶）進(jìn)一步產(chǎn)生氧自由基，或直接引起線粒體功能障礙，導(dǎo)致DA能神經(jīng)元死亡。
因其造成動(dòng)物的生物化學(xué)和神經(jīng)化學(xué)損傷類似于PD，故常被用于誘導(dǎo)動(dòng)物PD模型。
二、動(dòng)物模型帕金森模型簡(jiǎn)介
通過(guò)使用腦li體定wei注射技術(shù)將6-OHDA注射到前腦內(nèi)側(cè)束（其向前腦傳遞多巴胺能和5-羥色胺能投射）或紋狀體靶向黑質(zhì)紋狀體多巴胺能途徑來(lái)獲得帕金森模型大鼠。【具體的注射位點(diǎn)可以是黑質(zhì)致密部（substantia nigra pars compacta, SNpc）、紋狀體（striatum）或者位于二者之間的前腦內(nèi)側(cè)束（MFB）。】
可以進(jìn)行單側(cè)造模與雙側(cè)造模，其中單側(cè)造模可以提高動(dòng)物耐受力，并可以將正常側(cè)作為內(nèi)部控制組與造模側(cè)進(jìn)行對(duì)照研究，以便于更好地區(qū)分正常與異常運(yùn)動(dòng)區(qū)并評(píng)估損傷引起的運(yùn)動(dòng)缺陷。
三、動(dòng)物模型帕金森模型構(gòu)建方法
3.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
SD大鼠，8周齡
3.2實(shí)驗(yàn)材料
剪刀，立體定位儀，ss縫合線
3.3模型構(gòu)建流程
SD大鼠適應(yīng)一周后，腹腔麻醉，將麻醉后大鼠固定于腦li體定向儀上。
剪開頭皮后用棉簽輕輕擦拭顱骨表面，將前囟（bregma）和后囟（lambda）點(diǎn)暴露出來(lái)。
調(diào)節(jié)立li定wei儀，將前囟和后囟點(diǎn)的高度調(diào)節(jié)到一致。以前囟（Bregma）點(diǎn)為原點(diǎn)，找到注射位點(diǎn)所在的坐標(biāo)
用顱骨zuan沿注射坐標(biāo)位點(diǎn)鉆孔，以保證微量注射器進(jìn)針時(shí)不碰到孔壁。使用微量注射器吸取6-OHDA（注意避光），緩慢插入注射位點(diǎn)，以0.5ul/min的速度將6-OHDA注射到目標(biāo)腦區(qū)，注射劑量為4μl。
三、模型驗(yàn)證
由于動(dòng)物行為特異性差異，判斷大鼠帕金森病模型是否成功，通常以動(dòng)物出現(xiàn)旋轉(zhuǎn)行為的次數(shù)為標(biāo)準(zhǔn)，一般超過(guò)7轉(zhuǎn)/min即為成功的帕金森病模型，否則為不成功模型。
更新時(shí)間：2025-05-21 14:00:00
掃碼關(guān)注
歡迎來(lái)到